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实验抗原摄取对ELISA试剂盒的作用
浏览次数:254发布日期:2018-07-09

ELISA试剂盒任何血清学实验都依赖于具有价、特异性强的抗血清的发生,而抗血清的制备离不开抗原的搜集、保存和提取。采回的害虫饥饿24h后,将等体积的磷酸缓冲液(PBS)滴入备用的害虫中,研磨后参加过量的PBS(PH=7.4),在4℃下拌和24h,然后以4000-5000r/min的速度离心20h,别离上清液。沉渣用上法重复抽提一次。
将两次所得的上清液混合后,置于4℃下替换屡次冷盐水透析24h或48h。透析液用冰冻枯燥法或反透析法进行浓缩。浓缩液用紫外分光光度计测定蛋白质含量,得到适当浓度的蛋白质溶液即位抗原。
ELISA试剂盒抽提过程中应留意:①一切的处理都需在低温(4℃)下进行,以防蛋白质变性:②若抗原溶液需保存较长的时刻,则需加防腐剂(如NaN3)或在冻干状态下保存:③为制备特异性强的抗血清,抗原可用规范的生化技能进行纯化:④如一次不能搜集满足的抗原,可将每次的虫体保存在-20℃或将抗原冻干直到堆集满足的量。

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